Pruebas Bioquimicas Para La Identificacion De Levaduras 5jr5c

CAMINO A LA IDENTIFICACION DE LEVADURAS

Una de las tareas fundamentales de la microbiología es la aplicación de una metodología precisa que permita la identificación de los microorganismos implicados en procesos clínicos asociados a infecciones o de aquellos que tienen relación con el hombre como lo es en el campo de la industria; un claro ejemplo de estos microorganismos son los hongos que cumplen diversas funciones importante como lo es transformar la materia orgánica en materia inorgánica para mantener el equilibrio en los ecosistemas; dentro de este gran grupo o reino se encuentran las levaduras que son un tipo de hongos microscópicos unicelulares importantes por su capacidad de realizar el proceso de fermentación de diversos compuestos orgánicos como lo son azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias que sean utilices para otros seres vivos y generando asociaciones de benéfico mutuo e individuales, estas al formar parte de la microbiota de la piel y mucosas son las causantes de muchas infecciones que son provocadas por una variedad de especies razón por la cual es indispensable utilizar una técnica capaz de identificar el agente causante para dar un diagnóstico preciso y eficaz. Según Linares, y Col; 2007 existen una serie de métodos para llevar a cabo este proceso en los cuales se debe tener en cuenta cuatro criterios y que son complementarios entre sí: morfológicos, inmunológicos, genéticos y bioquímicos, este último se basa en la utilización de medios cromogénicos teniendo en cuenta pruebas enzimáticas y de asimilación de nutrientes que se caracterizan por ser métodos rápidos y específicos, pues permiten identificar el agente a partir del cultivo primario con la particularidad de no requerir mucha experiencia técnica. Actualmente estas pruebas bioquímicas se emplean en diferentes áreas, desde la clínica hasta la industria, donde ofrecen mejoría al momento de eliminar la necesidad del subcultivo, evitando así; que un cultivo se contamine durante la resiembra, puesto que la levadura puede sufrir cambios genéticos y bioquímicos así mismo economiza tiempo y dinero, debido a que se lograría omitir la elaboración de numerosas pruebas bioquímicas.

El fundamento de estas pruebas se basa en la localización de determinadas actividades enzimáticas por parte de las levaduras al realizar el proceso de hidrólisis de un sustrato cromogénico en presencia de un indicador de la enzima que al actuar sobre estos sustratos genera en ellos un cambio en su estructura, la cual se evidencia por un cambio de color en el medio producido por una variación de pH para facilitar el proceso de identificación ya sea según el tipo de azúcar capaz de fermentar.

En estos últimos años se ha promovido el uso de pruebas enzimáticas y de asimilación de nutrientes, métodos que resultan muy atractivos por la sencillez y rapidez con la que, según los fabricantes, se obtiene la identificación a nivel de especie (Cortes, et. Al. 2010), estos resultados pueden ser leídos en forma visual o automática a través de un Software convirtiéndola en una herramienta de identificación fácil de usar gracias a la rapidez con que se manipulan las pruebas y a la fiabilidad de los mismos. Además las pruebas bioquímicas permiten determinar las características metabólicas de las levaduras que están en objeto de identificación, algunas de estas pruebas son técnicas rápidas, ya que evalúan la presencia de una enzima preformada y su lectura varía entre unos segundos hasta unas pocas horas. No obstante, algunas de estas pruebas pueden realizarse de forma rápida tras incubación de unas 2-6h; en general, se trata de reacciones enzimáticas cromogénicas o pruebas convencionales modificadas. Otras pruebas requieren para su lectura el crecimiento del microorganismo con una incubación previa de 18h a 48h; a este grupo pertenecen la mayoría de las pruebas que detectan componentes metabólicos o aquellas que determinan la sensibilidad de un microorganismo a una sustancia dada tras cultivo en medios de identificación que contienen el sustrato a metabolizar. Asimismo estas pruebas tienen la particularidad de ser fácilmente asequible por profesionales y técnico debido a la comodidad de sus costos y porque se encuentran ampliamente distribuidas en el mercado generado en ellas un alto nivel de confiabilidad y seguridad, además no requieren de una infraestructura tan especializada por lo que pueden ser utilizadas en laboratorios convecionales a diferencia de otras pruebas que son más complejas que requieren de aparatos más especializados y son más utilizados en laboratorios de investigación; entre las desventajas que pueden generar se encuentran la interpretación de los colores por parte del operador. Sin embargo con respecto a esto último se han desarrollado equipos que facilitan la lectura de las placas como lo afirma Cuical, 2011.

Los laboratorios deben elaborar y realizar un proceso de identificación en su actividad diaria, que utilice de forma secuencial o simultanea un conjunto de pruebas cuyo propósito final sea la identificación del microorganismo a nivel de género y especie y que incluya la mayoría de las levaduras desde el punto de vista infeccioso. Por lo anteriormente señalado, es importante destacar que actualmente, se disponen una serie de pruebas bioquímicas que permiten la identificación presuntiva de levaduras provenientes de muestras clínicas e industriales constituyendo una herramienta de ayuda en el diagnóstico microbiológico, que permiten no sólo diferenciar las especies , sino también, establecer la implementación de un tratamiento y procedimiento adecuado. Sin embargo, cabe señalar que estas pruebas no requieren de una gran experiencia técnica para la interpretación de las mismas siendo estas rápidas, específicas y fácil de usar.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA  Fernández, A., García, C., Antonio, Valdezate, S. (2010). Procedimientos en microbiología clínica. Pruebas Bioquímicas. Cap. 2.4.4 PP 8.  Cortés A., et al. Sensibilidad y especificidad entro dos medios cromogenicos para la identificación de candida spp. 2010; 30(3): 78-82

 Linares, Sicilia, Solís, F, (2007). Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. Identificación de levadura, fundamento. Revista Iberoamericana de Micología. Cap. 11- PP. 1, 5  Cuaical, (2011). Medios cromogenicos, herramientas para la identificación fenotípica y detección de mecanismos de resistencia. Capítulo Metropolitano de la Sociedad Venezolana de Microbiología. Disponible en [http://gotasmicrobiologicas.blogspot.com/2011/02/medios-cromogenicos.html]